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植物葉綠素測(cè)定儀的實(shí)驗(yàn)步驟

更新時(shí)間:2022-06-08點(diǎn)擊次數(shù):2471

  植物葉綠素測(cè)定儀是用來(lái)測(cè)量葉綠素含量的儀器,可以即時(shí)測(cè)量植物的葉綠素相對(duì)含量(單位SPAD)或“綠色程度"從而可以了解植物真實(shí)的硝基需求量并且?guī)椭私馔寥老趸娜狈Τ潭然蚴欠襁^(guò)多地施加了氮肥。您可以通過(guò)這種儀器來(lái)增加氮肥的利用率,并可保護(hù)環(huán)境。下面為大家介紹下植物葉綠素測(cè)定儀的實(shí)驗(yàn)步驟:

  1.取新鮮植物葉片(或其它綠色組織)或干材料,擦凈組織表面污物,剪碎(去掉中脈),混勻。

  2.稱(chēng)取剪碎的新鮮樣品0.2g,共3份,分別放入研缽中,加少量石英砂和碳酸鈣粉及2~3ml95%乙醇,研成均漿,再加乙醇10ml,繼續(xù)研磨至組織變白。靜置3~5min。

  3.取濾紙1張,置漏斗中,用乙醇濕潤(rùn),沿玻棒把提取液倒入漏斗中,過(guò)濾到25ml棕色容量瓶中,用少量乙醇沖洗研缽、研棒及殘?jiān)鼣?shù)次,然后連同殘?jiān)黄鸬谷肼┒分小?/span>

  4.用滴管吸取乙醇,將濾紙上的葉綠體色素全部洗入容量瓶中。直至濾紙和殘?jiān)袩o(wú)綠色為止。然后用乙醇定容至25ml,搖勻。

  5.把葉綠體色素提取液倒入光徑1cm的比色杯內(nèi)。以95%乙醇為空白,在波長(zhǎng)665nm、649nm下測(cè)定吸光度。

  實(shí)驗(yàn)結(jié)果計(jì)算:將測(cè)定得到的吸光值代入下面的式子:Ca=13.95A665-6.88A649;Cb=24.96A649-7.32A665。據(jù)此即可得到葉綠素a和葉綠素b的濃度(Ca、Cb:mg/L),二者之和為總?cè)~綠素的濃度。然后根據(jù)下式可進(jìn)一步求出植物組織中葉綠素的含量:

  葉綠素的含量(mg/g)=[葉綠素的濃度×提取液體積×稀釋倍數(shù)]/樣品鮮重(或干重)。

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